NY/T 3196-2018 热带作物病虫害检测鉴定技术规程 芒果畸形病.pdf
文档页数：10文档大小：4.17MB文档格式：pdfICS65.020 B16 NY 中华人民共和国农业行业标准 NY/T3196-2018 热带作物病虫害检测鉴定技术规程 芒果畸形病 Technical code of practice for detection and identification of tropical crop diseases and insect pests- Mango malformation disease 2018-03-15发布 2018-06-01实施 中华人民共和国农业部发布 NY/T3196-2018 前言 本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草. 本标准由农业部农垦局提出. 本标准由农业部热带作物及制品标准化委员会归口. 本标准起草单位：中国热带农业科学院环境与植物保护研究所. 本标准主要起草人：蒲金基、张贺、漆艳香、张欣、喻群芳、谢艺贤、陆英、张辉强. I NY/T3196-2018 热带作物病虫害检测鉴定技术规程芒果畸形病 1范围 本标准规定了芒果畸形病病原菌芒果镰孢菌(Fusarium mangiferae Britz Wingfield et Mara- sas)鉴定方法. 本标准适用于芒果镰孢菌的检测鉴定 2鉴定原理 依据芒果镰孢菌特有的碱基信息 这山特性引物，对 寄主上的危害症状（参见附录A) 学 PB人S9PCR增结合连果 特征致病 性测定结果进 3仪器、试剂、培养基及配制方法 见附录B. 4检测鉴定方法 4.1症状诊断与取样 RESEAR 芒果树的嫩梢和花序发病后常形成从芽花)或簇芽花). 按附录A描述的症状仔细观察果树嫩梢和花序发现芒果畸形病疑似症我即取该嫩梢或花序 做样本，装人牛皮纸袋中供检 4.2PCR检测 4.2.1基因组DNA提取 见附录B () CH CEN 4.2.2引物及扩增条件 在PCR管中分别O入以下武剂C5L体系)后进行PCR反应：1gL基因组 DNA 10XPCR缓冲 液(Mg2Plus)2.5L 核糖核酸(dNP)混合物2L特异性引物 1-3R各0.5uL(见表 1) Taq酶0.2uL 灭菌超水18.3 刀 表NPCR反应的引物序列及扩增产物长度 引物名称 引物序 预期扩增产物长度 1-3F 5'-TGC AGA TAA TGA GGG TCT GC-3' 589bp 1-3R 5'-GGA ACA TTG GGC AAA ACT AC-3' 反应条件：95℃预变性3min 后30个循环为95℃变性40s;58℃退火45s;72℃延伸1min;最后 72℃延伸10min.取出PCR反应管，对反应产物进行电泳检测或4℃条件下保存，存放时间不超过 24h. 4.2.3反应体系中的对照设置 以病原菌Fusarium mangiferae基因组DNA作为模板的为阳性对照；以健康芒果果实种胚组织 提取的基因组DNA作为模板的为样品阴性对照；以配制反应体系的无菌超纯水代替DNA模板的为 PCR反应体系阴性对照. 1 ...
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